Метод идентификации капсул из бычьего и свиного желатина

Использование желатиновых капсул в фармацевтической и нутрицевтической промышленности широко распространено из-за их способности инкапсулировать различные соединения. Однако источник желатина, используемого в этих капсулах, может быть разным, причем два наиболее распространенных источника — бычий и свиной. В этой записи блога, как производитель высококачественных бычьих желатиновых капсул на заказ, Wecaps поделится с вами методом идентификации бычьих и свиных желатиновых капсул.

Понимание состава желатина

Желатин — это белок, полученный из коллагена, который извлекается из костей, кожи и соединительных тканей животных. Основное различие между бычьим и свиным желатином заключается в их исходных животных и конкретных типах коллагена, которые они содержат. Бычий желатин в основном получают из коллагена I типа, обнаруженного у коров, в то время как свиной желатин получают из коллагена I типа, обнаруженного у свиней.

Методы идентификации

Молекулярные методы

а) Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

ПЦР — это мощный метод молекулярной биологии, используемый для амплификации определенных последовательностей ДНК, что позволяет идентифицировать генетический материал источника желатина. Метод включает:

1. Подготовка образца: Извлеките ДНК из желатиновых капсул с помощью набора для извлечения ДНК. Это включает растворение желатина в буферном растворе и обработку его ферментами для высвобождения ДНК.

2. ПЦР-амплификация: используйте праймеры, специфичные для ДНК крупного рогатого скота или свиньи. Например, можно использовать праймеры, нацеленные на последовательности митохондриальной ДНК (мтДНК) крупного рогатого скота или митохондриальные гены свиньи, такие как цитохром b. Процесс ПЦР амплифицирует эти специфические последовательности, если они присутствуют.

3. Гель-электрофорез: Пропустите продукты ПЦР через агарозный гель, чтобы разделить их по размеру. Наличие специфических полос, соответствующих ДНК крупного рогатого скота или свиньи, подтвердит источник желатина.

б) ПЦР в реальном времени (кПЦР)

ПЦР в реальном времени, или количественная ПЦР, — это передовая технология, которая позволяет проводить количественную оценку ДНК и обеспечивает большую чувствительность, чем традиционная ПЦР. Она включает:

1. Подготовка образца: аналогично ПЦР, извлеките ДНК из желатиновых капсул.

2. ПЦР в реальном времени: используйте флуоресцентные зонды или красители, которые связываются с определенными последовательностями ДНК. Интенсивность флуоресценции коррелирует с количеством целевой ДНК, что позволяет количественно определить ДНК крупного рогатого скота или свиньи.

3. Анализ данных: проанализируйте данные флуоресценции, чтобы определить наличие и количество ДНК крупного рогатого скота или свиньи, тем самым определив источник желатина.

Методы на основе белков

а) Масс-спектрометрия (МС)

Масс-спектрометрия может быть использована для анализа белкового состава желатина. Процесс включает в себя:

1. Подготовка образца: Растворите желатин в подходящем растворителе и обработайте его протеолитическими ферментами, чтобы разложить его на пептиды.

2. Анализ пептидов: используйте масс-спектрометрию для анализа фрагментов пептидов. Сравните профили пептидов с известными профилями бычьего и свиного желатина, чтобы определить источник.

б) Матрично-активированная лазерная десорбция/ионизация (MALDI) MS

MALDI MS — это особый тип масс-спектрометрии, используемый для идентификации белков и пептидов. Процесс включает:

1. Подготовка образца: Подготовьте матрицу с образцом желатина и нанесите ее на мишень МАЛДИ.

2. Масс-спектрометрия: Проанализируйте образец, чтобы получить масс-спектр. Пики спектра соответствуют массам пептидных фрагментов и могут быть сравнены с известными спектрами бычьего и свиного желатина.

в) Электрофорез

Электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE) — это метод, используемый для разделения белков по размеру:

1. Подготовка образца: Растворите желатиновые капсулы в буфере для образцов и нанесите их на гель SDS-PAGE.

2. Электрофорез: разделите белки по размеру и сравните рисунок полос геля с контрольными образцами бычьего и свиного желатина.

3.Идентификация белков: используйте методы вестерн-блоттинга или окрашивания для идентификации специфических белков, характерных для бычьего или свиного желатина.

Спектроскопические методы

а) Фурье-инфракрасная спектроскопия (FTIR)

ИК-Фурье-спектроскопия определяет молекулярный состав на основе поглощения инфракрасного излучения:

1. Подготовка образца: Подготовьте образец желатина в виде тонкой пленки или используя таблетку KBr.

2. Спектроскопия: Анализ образца с использованием FTIR. Различные источники желатина имеют различные образцы инфракрасного поглощения, соответствующие их молекулярным колебаниям.

3. Интерпретация данных: Сравните спектры ИК-Фурье с эталонными спектрами для бычьего и свиного желатина.

б) Спектроскопия ядерного магнитного резонанса (ЯМР)

ЯМР-спектроскопия дает подробную информацию о молекулярной структуре желатина:

1. Подготовка образца: Растворите желатин в подходящем растворителе для ЯМР-анализа.

2. Спектроскопия: Проведите ЯМР-спектроскопию для получения данных о химическом сдвиге. Проанализируйте спектры для определения специфических молекулярных особенностей бычьего или свиного желатина.

3. Сравнение: Сравните данные ЯМР с эталонными спектрами для известного бычьего и свиного желатина.

Желатиновые капсулы Wecaps специально разработаны как пероральная лекарственная форма для фармацевтических составов. Эти капсулы изготавливаются из высококачественного бычьего коллагена и производятся в ходе точно контролируемого процесса. Они обладают превосходной биосовместимостью, стабильностью и безопасностью, что делает их оптимальным материалом для носителей лекарств. Добро пожаловать на консультацию к нашему сервису по кастомизации желатиновых капсул!